L’espressione in lievito può essere vantaggiosa soprattutto per la produzione di proteine ricombinanti eucariotiche. Il sistema (Pichia pastoris) impiega meno di 10 settimane dal clonaggio alla produzione. Il servizio di produzione ricombinante di proteine in lievito comprende:
- clonaggio ed espressione di proteine di interesse.
- ottimizzazione dei livelli di produzione,
- scale up da beute a fermentatori, da condizioni di laboratorio a condizioni industriali,
Fasi:
Amplificazione/isolamento del gene di interesse (GOI) da un costrutto fornito dal cliente e clonaggio in un vettore di espressione.
- Verifica del gene clonato mediante analisi di restrizione e sequenziamento.
- Clonaggio del gene e trasformazione di un ceppo di P. pastoris proprietario.
- Conferma della sequenza di inserimento.
- Test di produzione e verifica mediante SDS-PAGE e Western Blot
- Produzione su scala 1-3 litri e ottimizzazione del downstream process (protocollo di purificazione della
proteina prodotta in condizioni native o denaturate).
Deliverables:
- Proteine ricombinanti
- Documentazione
La solubilità della proteina ricombinante non è garantita.